Przeciwciała przeciwko antygenom MICA i odrzuceniu przeszczepu nerki ad

Przetestowaliśmy próbki surowicy pod kątem przeciwciał przeciwko antygenom MICA i skorelowaliśmy wyniki z wynikiem klinicznym. Metody
Kolekcja próbek
Próbki surowicy przedtransplantacyjnej od 1910 biorców nerek, którzy przeszli transplantację narządów od zmarłych dawców w latach 1990-2004, dostarczyło 20 ośrodków w 13 krajach. Ośrodki uwzględnione w tej analizie przedstawiły pisemne zapewnienie zgodności z lokalnymi wytycznymi dotyczącymi etyki i zgody oraz pisemną zgodę pacjentów na wykorzystanie danych do analizy naukowej. Badanie zostało zatwierdzone przez komisję etyczną Uniwersytetu w Heidelbergu.
Testy laboratoryjne
Reaktywność IgG anty-HLA klasy I w próbkach surowicy została przetestowana przy użyciu zestawów immunoenzymatycznych testu ELISA (Quickscreen) i dla reaktywności IgG anty-HLA klasy II przy użyciu zestawów ELISA B-Screen (GTI Diagnostics). Typowanie HLA i przeciwciała HLA o strukturze płytkowej były określane przez laboratoria typowania tkanki w uczestniczących ośrodkach.
Testy na przeciwciała IgG przeciwko antygenom MICA przeprowadzono z użyciem rozpuszczalnych antygenów MICA wytwarzanych w komórkach owadzich sprzężonych z mikroperełkami polistyrenu (Luminex) w naszym laboratorium w Dallas. Antygeny te były oparte na naszych poprzednich komplementarnych konstruktach DNA MICA * 001, MICA * 002, MICA * 004, MICA * 008 i MICA * 009.18 Fragmentów kodujących peptyd sygnałowy i zewnątrzkomórkowe domeny tych białek, w tym sekwencja rozpoznawana dla enzymów. biotynylację i sekwencję kodującą 6-histydynę z kodonem stop klonowano do wektora pEnter-3C (Invitrogen) i wybrano po sekwencjonowaniu. System bakulowirusowy zastosowano do produkcji rozpuszczalnych białek w komórkach owadzich High Five (Invitrogen). Te rekombinowane białka oczyszczono metodą powinowactwa za pomocą agarozy o powinowactwie do niklu i połączono w dwóch powtórzeniach z karboksylowanymi mikrokuleczkami polistyrenu i po biotynylowaniu, do mikrosfer LumAvidin (Luminex).
W celu przeprowadzenia testu próbki surowicy lub próbki kontrolne inkubowano z obydwoma zestawami perełek i poddawano reakcji z kozim przeciwciałem IgG sprzężonym z fikoerytryną (One Lambda). Fluorescencję odczytano za pomocą cytometru przepływowego Luminex 100 (Luminex). Próg został określony dla każdej kulki ze średniej wartości względnej ilości wiązania plus 3 SD w próbkach surowicy od 21 osób zdrowych. Według względnej ilości wiązania i progu dla każdej kulki, wynik był ujemny, 2 było wątpliwe, 4 było słabo pozytywne, 6 było pozytywne, a 8 było silnie pozytywne. Do analizy wyniku przeszczepu wyniki i 2 uznano za negatywne, a wyniki od 4 do 8 uznano za pozytywne. Reakcje uznawano za pozytywne, gdy sprzężone z karboksylacją i sprzężone z awidyną perełki z danym antygenem były zarówno dodatnie.
Analiza statystyczna
Funkcję aloprzeszczepu analizowano 3, 6 i 12 miesięcy po transplantacji. Żaden pacjent nie został wykluczony z jakiegokolwiek powodu. Dwudziestu trzech pacjentów (1,2%) straciło czas obserwacji w ciągu 3 do 6 miesięcy po transplantacji, a 34 (1,8%) zostało utraconych w celu obserwacji po 6-12 miesiącach po transplantacji. Współczynniki przeżycia aktomarialnego obliczono zgodnie z metodą Kaplana-Meiera19 i wyrażono jako wartości procentowe średnie (. SE)
[więcej w: ktd młodzieńcza, denar oborniki, konflikt rzepkowo udowy ]

Ten wpis został opublikowany w kategorii Bez kategorii i oznaczony tagami , , . Dodaj zakładkę do bezpośredniego odnośnika.

0 odpowiedzi na „Przeciwciała przeciwko antygenom MICA i odrzuceniu przeszczepu nerki ad

  1. Ewa pisze:

    Article marked with the noticed of: Icoone Wrocław[…]

  2. Shadow Chaser pisze:

    czym grozi nieleczona niedoczynność tarczycy

  3. Nikola pisze:

    [..] odnosnik do informacji w naukowej publikacji odnosnie: leczenie kanałowe warszawa cennik[…]

  4. Lilianna pisze:

    poza tym skurcze, bóle głowy, nerwowość